梧桐籽成分提取工藝的淺析

梧桐籽，即梧桐科植物梧桐樹所結的種子，大小 似花椒，皮皺。梧桐籽，可入食，亦可入藥。據《本草 綱目》記載，“梧桐籽，氣味甘平，無毒”，具有“順氣、 和胃、消食”的功能。隨著人們對營養保健的重 視程度逐年提高，以種子為原料進行的生理活性研 究受到越來越多研究者的關注。研究表明，梧桐籽 中有效成分具有激活內源性凝血途徑，促進血小板 凝集 的 作 用，緩解 鼻 出 血，縮短傷口出血時間，抑制膽堿酯酶進而降低血壓等功效。此外， 在中醫角度上，梧桐籽還具有行氣健脾、潤肺、 解毒、收瘡生肌、清熱、通小便等功效。由 此可知，梧桐籽既能在一定程度上滿足人體對常規 營養物質的需求，又能表現一定的生物活性，如提高 免疫力、延緩氧化衰老等。

梧桐籽由中韓食品生物技術研究所（青島農業 大學）提供；ＤＰＰＨ 由 Ｓｉｇｍａ中國有限公司提供；無 水乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯由萊陽市康德化工 有限公司提供；其余試劑均為國產分析純。

ＷＦＺＵＶ－２０００紫外 分 光 光 度 計，尤 尼 柯（上 海）儀器有限 公 司；ＴＧＬ－１６Ｍ 高速 臺 式 冷 凍 離 心 機，湖南湘儀離心機儀器有限公司；ＡＲ１１４０型電子分析天平，奧豪斯國際貿易（上海）有限公司；高速多 功能粉碎機，浙 江 省 永 康 市 紅 太 陽 機 電 有 限 公 司； ｐＨ２１１臺式酸度測定儀，意大利哈納公司；恒溫培 養箱，上海新苗醫療機械制造有限公司；超聲波清洗 器，昆山市超聲儀器有限公司。

試驗以梧桐籽作為研究對象，經過挑 選、清 洗、 烘干、去殼、干燥、粉碎、密封、冷藏等工序制成初級 樣品，以備后續之用。

參照 Ｃｈｅｎｇ、Ｍａｒｌａ、Ｃｈｏｉ等的 研 究，對 ＤＰＰＨ 清除率的試驗步驟進 行 設 計，以 ＶＥ 作為 參 照，并測定樣品。其計算如下： ＤＰＰＨ 清除率（％）＝ ［Ａ對照 －（Ａ樣品 － Ａ樣品 參 照 ）］／Ａ對照 （１） 式中：Ａ 為吸光值（ＡｂｓｏｒｂａｎｃｅＶａｌｕｅ）的代指。

參照 Ａｌ－Ｊｕｈａｉｍｉ、Ｗａｎｉ、Ｂｈｕｉｙａ等的 研究，對梧桐籽抗氧化活性成分進行單因素試驗。

以水、無水乙醇、石油醚、乙酸乙酯等提取溶劑， 在料液比１∶１０、提取溫度５０ ℃、提取時間３０ｍｉｎ 的條件下，以 ＤＰＰＨ 清除 率 為 指 標，將 清 除 率 高 的 樣品所用的提取溶劑視為本試驗的最佳提取溶劑。

用１．４．１所確定的最佳提取溶劑，設置２０、３０、 ４０、５０、６０ｍｉｎ為提取時間，在料液比１∶１０、提取溫 度５０ ℃的條件下，以 ＤＰＰＨ 清除率為指標，將清除 率高的樣品所用的提取時間視為本試驗的最佳提取 時間。

在１．４．１所確定的最佳 浸 提 溶 劑、１．４．２所確 定的最佳提取時間進行提取，在提取溫度５０ ℃下， 以１∶４、１∶６、１∶８、１∶１０、１∶１２、１∶１４為提取料 液比，以 ＤＰＰＨ 清除 率 為 指 標，將 清 除 率 高 的 樣 品 所在的料液比視為本試驗的最佳料液比。 １．４．４ 最佳提取溫度的確定 在１．４．１所確定的最佳 提 取 溶 劑、１．４．２所確定的最佳提取時間、１．４．３所確定的最佳料液比 下 進行提 取，以 ３０、４０、５０、６０、７０ ℃ 為 提 取 溫 度，以 ＤＰＰＨ 清除率為指標，將清除率高的樣品所在的提 取時間視為本試驗的最佳提取時間。

不同浸提溶劑下所得梧桐籽提取 液對 ＤＰＰＨ 清除 率 存 在 差 異。不同溶劑提取條件 下，梧桐籽提 取 液 ＤＰＰＨ 清除 率 的 大 小 關 系 為：乙 酸乙酯＞石油醚＞水＞無水乙醇。由此可知，乙酸 乙酯是此次試驗設計條件下的最佳提取溶劑，梧桐 籽乙酸乙酯提取液對 ＤＰＰＨ 的清除率為６０．９３％。 ２．１．２ 提取時間對 ＤＰＰＨ 清除率的影響。不同提取時間下，梧桐籽乙酸乙酯提取 液 ＤＰＰＨ 清除率的大小關系為：５０ｍｉｎ＞４０ｍｉｎ＞ ３０ｍｉｎ＞６０ｍｉｎ＞２０ｍｉｎ；隨著提取時間的增加，梧 桐籽乙酸乙 酯 提 取 液 對 ＤＰＰＨ 的清 除 率 出 現 先 升 高后降低的趨勢，在５０ｍｉｎ時，梧桐 籽 乙 酸 乙 酯 提 取液對 ＤＰＰＨ 的清除率達到最高。由此可知，乙酸 乙酯作為提取溶劑時，最佳提取時間為５０ｍｉｎ。此 時，梧桐籽提取液對 ＤＰＰＨ 的清除率為６５．３０％。以 乙 酸 乙 酯 為 最 佳 提 取 溶 劑，５０ ｍｉｎ為最佳提取時間時，不同料液比條件下，梧桐籽 提取液對 ＤＰＰＨ 清除率的影響存在差異。不 同 料 液比下，梧桐籽乙酸乙酯提取液對 ＤＰＰＨ 清除率的 大小關系為：１∶６＞１∶４＞１∶８＞１∶１０＞１∶１２＞ １∶１４。隨著料液比的減小，梧桐籽乙酸乙酯提取液 對 ＤＰＰＨ 清除率呈現先升高再降低的趨勢，在料液 比１∶６時達到最高；綜上所述，通過單因素試驗，梧桐籽抗氧化活性 成分的最佳提取工藝為：提取溶劑乙酸乙酯，提取時 間５０ｍｉｎ，料液比１∶６，提取溫度６０ ℃。

３ 結果與討論

３．１ 結果

（１）本文 通 過 ＤＰＰＨ 清除 試 驗，對 梧 桐 籽 抗 氧 化活性物質提取工藝中的提取溶劑、提取時間、料液 比、提取溫度等因素進行了確定。單因素試驗結果 顯示，最佳提 取 試 劑 為 乙 酸 乙 酯、最佳提取時間為５０ｍｉｎ、最 佳 料 液 比 為 １∶６、最 佳 提 取 溫 度 為 ６０ ℃。響應面優化試驗結果顯示，梧桐籽抗氧化活性 成分最佳提取工藝條件為：提取溶劑乙酸乙酯、提取 時間４５ｍｉｎ、料液比１∶５、提取溫度５５ ℃，與單因 素試驗結果基本相吻合。
（２）在響應面優化的最佳提取工藝下，梧桐籽提 取液對 ＤＰＰＨ 的清除率達到了９４．２５％。與單因素 各試驗組梧桐籽提取液對 ＤＰＰＨ 的清除率相比，經 過響應面優 化 的 梧 桐 籽 提 取 液 對 ＤＰＰＨ 的清 除 率 有所增強。由此可知，響應面優化的結果符合優化 的目的。
（３）將 最 優 提 取 工 藝 條 件 下 梧 桐 籽 提 取 液 的 ＤＰＰＨ 清除效果與維生素 Ｅ（ＶＥ）進行比較發現，最 佳提取工藝下，最優提取工藝條件下梧桐籽提取液 的 ＤＰＰＨ 清除效果相當于１４７．３９ｍｇ／Ｌ 的 ＶＥ 的 ＤＰＰＨ 清除效果。經過測定，最佳提取工藝條件下， 梧桐籽乙酸乙酯提取物中主要抗氧化成分中含量最 高的為總黃酮，其次是總多肽、總多酚、總氨基酸。

３．２ 討論

本研究發現，濃度為２００ｍｇ／ｍＬ的梧桐子乙酸 乙酯提取物對 ＤＰＰＨ 的清除 率 達 到 了９４．２５％，其 對 ＤＰＰＨ 清除效果相當于１４７．３９ｍｇ／Ｌ 的 ＶＥ 乙 酸乙酯溶液，梧桐籽乙酸乙酯提取物中主要抗氧化 成分總黃酮的含量最高。李現日等研究表明，金 花葵花乙酸乙酯相中黃酮含量與抗氧化活性存在顯 著的相關關 系（ｐ ＜０．５）。華艷 宏等研 究 發 現， 不同有機溶劑對藜麥種子的提取物中含有總黃酮、 總多酚等抗氧化活性成分，且提取物對 ＤＰＰＨ 均存 在一定的清除作用。李治明等發現，皇后葵果實 乙醇提取物中含有總黃酮，且該物質含量與 ＤＰＰＨ 清除能力之間呈正相關性。吳雙等研究表明，海 濱錦葵種子乙酸乙酯提取物中含有黃酮，且該提取 物對 ＤＰＰＨ 具有清除活性。據此，推測梧桐子乙酸 乙酯提取物 對 ＤＰＰＨ 的清 除 活 性 與 該 提 取 物 中 存 在一定的總黃酮物質存在有關，且有待于對梧桐子 乙酸乙酯提取物中總黃酮含量及該提取物對 ＤＰＰＨ 清除能力之間相關性的強弱進行確認。