果皮和果肉中酚類中的分析

八月瓜（Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz.）為木通 科木通屬落葉藤本植物，其果實又稱木通子、八月扎、 八月炸、預知子等，是一種集藥用、食用于一身的野生 經濟植物，分布于我國南部、長江流域和西北地區(qū)。 八月瓜果實、葉、種子和根中富含糖、維生素、礦物質、 有機酸、氨基酸、油脂、木質素、多酚、黃酮及抗衰老等 成分，可鮮食，也可釀酒、制醋、加工成果脯等食品。 民間多用于治療小便赤澀、淋濁水腫、胸中煩熱、喉痹 咽痛、遍身拘痛、婦女經閉、乳汁不通等疾病。

八月瓜葉和果實采自貴州省遵義縣沙灣鎮(zhèn)八一 村，經貴陽學院副教授楊碧仙鑒定為木通科木通屬植 物三葉木通 Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz.的葉和果實，將八月瓜貯藏于 4 ℃采樣箱運回貴州省果品加工工程技術研究中心實驗室，果肉和果皮分離，果肉去 籽后，-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?沒食子酸、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、p-香豆酸、 阿魏酸、鞣花酸、蘆丁和槲皮素（9 種酚類分析標準品，純 度≥95.0 %）、甲醇、三氟乙酸（色譜純，純度≥99.5 %）： 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；抗壞血酸、三氯 乙酸（trichloroacetic acid，TCA）分析純、福林酚（FolinCiocalteu）試劑：上海聚源生物科技有限公司；Trolox 試 劑、三吡啶三吖嗪 （tripyridyltriazine，TPTZ）、2，2-聯(lián) 氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽 [2，2-azinobis（3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid）diammoni－ um salt，ABTS]：美國 Sigma 公司。其他試劑均為國產分 析純。

LC-20A 高效液相色譜儀、UV-2550 型紫外分光 光度計：日本島津公司；KQ5200DE 超聲清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；IKA A11 研磨機：IKA 公司 （德 國）；C18 色譜柱 （250 mm×4.6 mm，5 μm）：Waters 公司 （中國上海）。

稱取 10 g 樣品研磨成漿，取 2 g 果漿于 10 mL 離 心管中，加入 4.0 mL 70 % 甲醇溶液，50 ℃超聲波輔助 提取 30 min，冷卻后 10 000 r/min 離心 15 min，將上清 液過濾到 10 mL 的容量瓶中，加入 3.0 mL 70 %甲醇溶 液于殘渣中再提取 30 min，在 4 ℃、12 000 r/min 離心 10 min，合并上清液，用 70 %甲醇溶液定容，用 0.45 μm 的濾膜過濾后待測，取 1.0 mL 轉移至進樣瓶中等待進 樣，每個樣品 3 次重復。

準確稱取 9 種酚類物質標準品各 10.00 mg，用甲 醇溶解并定容至 10.0 mL，配制成 1.00 mg/mL 的酚類物質標準品貯備液，保存于-4 ℃冰箱備用。

9 種多酚化合 物的標準品得到了較好的分離 （圖 1A），野生八月瓜 葉、果皮和果肉樣品溶液色譜圖（圖 B、C、D）中的 9 個 目標峰，其保留時間與標準品溶液的 9 個色譜峰保留 時間一致。在此色譜條件下，八月瓜葉、果皮和果肉中 的酚類成分得到較好的分離。八月瓜葉、果皮和果肉中各成分含量差 異顯著 （P＜0.05），各部位活性成分含量大小順序為： 葉>果皮>果肉，其中葉中沒食子酸、兒茶素、p-香豆 酸、阿魏酸、鞣花酸、蘆丁、槲皮素、抗壞血酸和總酚含 量相對較高，其中沒食子酸含量 （[ 715.64±4.69）μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 12 倍；兒茶素含量（[ 9.16± 0.41）μg/g Fw]是果皮、果肉的 3 倍和 17 倍；p-香豆酸 含量（[ 0.6±0.06）μg/g Fw]是果皮的 7.5 倍，果肉中未檢 測到；阿魏酸含量（[ 7.88±0.43）μg/g Fw]是果皮、果肉的 1.3 倍和 88 倍；鞣花酸含量（[ 147.61±0.87）μg/g Fw]是 果皮、果肉的 12 倍和 9 倍；蘆丁在葉中含量（[ 50.24± 1.53）μg/g Fw]是果皮和果肉的 10 倍，蘆丁在果肉和果 皮中的含量差異不顯著（P＞0.05）；槲皮素含量（[ 27.36± 0.77）μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 9 倍；抗壞血酸含 量（[ 200.12±0.23）mg/100 g FW]是果皮、果肉的 7 倍和 81 倍；總酚（[ 3.44±0.11）mg/g FW]含量是果皮、果肉的 1.3 倍和 43 倍。而果皮中綠原酸和表兒茶素含量相對 較高，其中綠原酸含量（[ 52.82±0.71）μg/g Fw]是葉、果 肉 1.2 倍和 123 倍；表兒茶素含量 （[ 1.08±0.10）μg/g Fw]是葉、果肉 3 倍和 18 倍。八月瓜葉和果皮中總黃酮 含量差異不顯著（P＞0.05），葉和果皮中總黃酮含量是 果肉（[ 0.19±0.00）μg/g Fw]的 24 倍。綜上所述，八月瓜 除了可食用部分果肉，其葉和莖均含有較高的活性物 質且不同部位間存在顯著差異。

邵顯會分析了三葉木通不同部位總黃酮含量，發(fā) 現(xiàn)黃酮含量從高到低依次是根（5.72 %）＞葉（4.5 %）＞果 皮（2.0 %）＞果肉（0.2 %），張孟琴等分析了三葉木通 果皮黃酮含量（2.32 %），本研究發(fā)現(xiàn)不同部位黃酮含 量的總體趨勢和邵顯會等研究一致，但含量顯著低于 邵顯會和張孟琴等報道，且總黃酮在果皮和葉中含量 差異不顯著；歐陽玉祝等用離子沉淀法分離了果皮 中總多酚，總多酚提取率為 5.103 7 %，顧仁勇等響應 面優(yōu)化超臨界 CO2 萃取八月瓜幼果多酚，八月瓜幼果 多酚萃取得率可達 6.41 %，本研究發(fā)現(xiàn)八月瓜不同部 位多酚含量的總體趨勢與陸俊等的研究一致，但含量 顯著低于文獻報道，發(fā)現(xiàn) VC、黃 酮含量、總酚含量和個別酚類成分與抗氧化能力間有 顯著相關性，因此八月瓜不同部位的抗氧化能力不 一，且葉和果皮的抗氧化能力顯著高于果肉，可考慮 作為天然抗氧化劑，用于美容護膚品、植物酚類保健 品或者防止心腦血管疾病藥物的開發(fā)。