甘松化學成分的研究

敗醬科甘松屬共有3種植物,即甘松NardostachyschinensisBatal.?匙葉甘松NardostachysjatamansiDC.?大花甘松NardostachysgrandifloraDC.[1],其中甘松又名苦彌哆?甘松香?香松?人身香?麝果?邦貝[2],是我國二級保護藏藥,也是目前敗醬科植物唯一被《中國藥典》收錄的,具有抗心律失常[3]?抗心肌缺血[4]?抗氧化[5]?止痛?抗瘧[6]等多種生物活性,主要分布于青海?四川?云南和西藏[1],從中分離得到的化學成分主要有黃酮類?香豆素類?木脂素類?新木脂素類[7],以及各種類型的倍半萜(如馬兜鈴烷型倍半萜?甘松新酮型倍半萜?愈創木烷型倍半萜?lemnalane型倍半萜[8]等)?本實驗對甘松95%乙醇提取物進行研究,從中分離得到10個化合物,其中化合物8是甘松的特征成分,9~10為首次從甘松屬中分離得到?

LC-20AT 高效液相色譜儀 ( 日本島津公司) ; Waters 600 半制備液相色譜儀?Waters 2545 液相質譜聯用儀 ( 美國 Waters 公司) ; YMC-Pack ODSA 色譜柱 ( 150 mm× 20 mm,5 μm) ; RE-2000 旋 轉蒸發器 ( 上海亞榮生化儀器廠) ; SHZ-D-Ⅲ循環 水真空泵 ( 鞏義市予華儀器有限責任公司) ; KQ500DE 型數控超聲波清洗器 ( 昆山市超聲儀器有 限公司) ? 柱層層析硅膠 ( 200 ~ 300 目,青島海洋化工 有限 公 司) ; ODS 柱 填 料 ( 日 本 YMC 公 司) ; Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠 ( 瑞典 GE Healthcare 公司) ?氯仿?甲醇?石油醚 ( 沸程第Ⅱ類,60 ~ 90 ℃ ) ?丙酮均為分析純 ( 天津富宇精細化工有限 公司) ; 甲 醇 為 色 譜 純 ( 德 國 Merck 公 司) ; 水 ( 中糧可口可樂飲料新疆有限公司) ? 甘松于 2016 年 9 月采自湖北,經石河子大學 藥學院吳增寶副教授鑒 定為甘松 Nardostachys chinensis Batal.,標本 ( GS201609) 存放于新疆植 物藥資源利用教育部重點實驗室?

將干燥的甘松 ( 4. 0 kg) 粉碎,分別用 20 L 95%乙醇提取 3 次,2 h /次,減壓濃縮提取液,得 到總浸膏 426. 0 g?采用硅膠柱對總浸膏進行分段,分別以 CHCl3-MeOH ( 10 ∶ 1?5 ∶ 1?2 ∶ 1) 為流 動 相 進 行 洗 脫,得 浸 膏 Fr. 1 ( 118. 0 g ) ?Fr. 2 ( 131. 2 g) ?Fr. 3 ( 76. 8 g) ?

取 Fr. 1 部分,經硅膠柱氯仿-甲醇 ( 10 ∶ 1) 再次分離?薄層色譜檢識,得到 6 個流份 Fr. 1A ~ Fr. 1F?Fr. 1A 中析出白色針羽狀晶體,以 95%乙 醇重結晶得到化合物 1 ( 12. 5 mg) ; Fr. 1C 經反相 硅膠柱色譜甲醇-水 ( 1 ∶ 4?2 ∶ 3?3 ∶ 2?4 ∶ 1? 1 ∶ 0) 梯度洗脫,得 Fr 1C1-Fr 1C5 5 個流份,再采 用 反 相 硅 膠 柱 對 Fr 1C2-4 進 行 分 離, Fr 1C2 ( 14. 3 g) 經 反 相 硅 膠 柱 甲 醇-水 ( 2 ∶ 3?3 ∶ 2? 4 ∶ 1?1 ∶ 0) 梯度洗脫,得 Fr 1C2-1-C2-4,Fr 1C3 ( 27. 4 g) 經 反 相 硅 膠 柱 甲 醇-水 ( 2 ∶ 3?3 ∶ 2? 4 ∶ 1?1 ∶ 0) 梯度洗脫,得 Fr 1C3-1-C3-4?Fr 1C4 ( 19. 1 g) ,經反相硅膠柱甲醇-水 ( 1 ∶ 1?4 ∶ 1) 梯度洗脫得 Fr 1C4-1-C4-2?

Fr 1C2-2 ( 3. 5 g) 經正相硅膠柱石油醚-丙酮 ( 3 ∶ 1) ,Sephadex LH-20 甲醇-水 ( 4 ∶ 1) 洗脫得 化合物 2 ( 4. 1 mg) ; Fr 1C3-2 ( 5. 9 g) 經正相硅膠 柱石油醚-丙酮 ( 3 ∶ 1) ,得 Fr 1C3-2-1 ~ Fr 1C3-2-4, Fr 1C3-2-1經 Sephadex LH-20 甲醇-水 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C3-2-1-1 ~ Fr 1C3-2-1-25,Fr 1C3-2-1-12經半制備液相甲醇水 ( 2 ∶ 3) ,得化合物 3 ( 1. 8 mg) ?4 ( 2. 2 mg) ; Fr 1C4-1 ( 7. 0 g) 經正相硅膠柱石油醚-丙酮 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C4-1-1和 Fr 1C4-1-2,Fr 1C4-1-1 ( 0. 8 g) 和 Fr 1C4-1-2 ( 0. 56 g ) 經 Sephadex LH-20 甲 醇-水 ( 4 ∶ 1) ,得 Fr 1C4-1-1-1?Fr 1C4-1-1-2?Fr 1C4-1-1-3?Fr 1C4-1-2-1和 Fr 1C4-1-2-2,Fr 1C4-1-1-1經半制備液相甲醇水 ( 3 ∶ 7) ,得化合物 5 ( 2. 3 mg) ,Fr 1C4-1-2-1經 半制備 液 相 甲 醇-水 ( 1 ∶ 4) ,得 化 合 物 6 ( 3. 1 mg) ,Fr1C4-2 ( 10. 3 g ) 經反相硅膠柱甲醇-水 ( 2 ∶ 3?3 ∶ 2?4 ∶ 1?1 ∶ 0) 梯度洗脫,得 4 個亞 組分 Fr1C4-2-1-Fr1C4-2-4,Fr1C4-2-2經半制備液相甲醇水 ( 2 ∶ 3) 得化合物 7 ( 5. 3 mg) ?8 ( 11. 6 mg) , Fr1C4-2-3經半制備液相甲醇-水 ( 9 ∶ 11) 得化合物 9 ( 1. 5 mg) ?10 ( 0. 72 mg) ?

化合物 1: 白色針羽狀結晶,可溶于 95% 乙 醇?丙酮,不溶于水,與 β-谷甾醇標準品薄層色 譜比較,多種展開系統下兩者均具有相同的 Rf 值;與 β-谷甾醇紅外光譜比較,特征吸收峰均相同[9], 故鑒定為 β-谷甾醇?